Kidney Int ：肾小管生物钟调节失常导致糖尿病患者肾糖异生增强和加重高血糖

剧中及用以：在哮喘病患里面，肝脏通过缩减原胃里面的重吸收和调高近端粘液里面的新陈葡萄糖来作出贡献哮喘低鲜低血糖的起因。然而，鲜低血糖水平的慢性上升也许反过来导致哮喘白血病(DN)，这是哮喘最严重的癌症之一，其特质是微血管、肾粘液和肝脏鲜血管壁受损。虽然葡萄糖应激是哮喘白血病起因和工业发展的主要因素所，但在大多数哮喘病患里面，低鲜低血糖本身并不想导致肾功用不全。这暗示，合并症或环境、表标准型或表观表标准型的变化也许是激活和/或加快重大突破DN所要能的。做梦是一种或多或少的底物记分选择性，它将细胞会、组织和子系统的生物学功用与24全程的环境周期同步。局部做梦涡轮机细胞会类标准型和组织特有的节律，它们的痉挛与一系列疾病的发病和/或重大突破有关。然而，哮喘病患肝脏里面内在做梦的病症生理作用仍不似乎。

作法：为了彻底解决这个缺陷，我们用氨基酸脲佐青霉素诱导了足细胞会(cKOp昆虫模标准型)或肾粘液(cKOt昆虫模标准型)里面缺乏昼夜节律转录缓冲因子BMAL1的昆虫模标准型患I标准型哮喘。

昆虫模标准型模标准型制备：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1昆虫模标准型(cKOp昆虫模标准型)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1昆虫模标准型(cKOt昆虫模标准型)经DOX(取水里面2 mg/ml)处理2周后，Bmal1(ARNTL)基因组失活。他们的样本(Bmal1lox/lox昆虫模标准型)给予不同的DOX治疗。在DOX治疗结束一周后，通过十二指肠施用氨基酸脲佐青霉素(STZ，50 mg/kg运动量，每日5天)诱导I标准型哮喘。溶媒处理的昆虫模标准型给予PBS的溶媒施用。所有实验室以外在最后一次施用STZ或溶媒8周后进行时。在所有实验室里面，从ZT9处死的昆虫模标准型身上采集组织和鲜血液(ZT-Zeitgeber间隔时间单位；ZT0是开灯间隔时间，ZT12是关灯间隔时间)。

葡萄糖突起：昆虫模标准型被捕猎在个体葡萄糖突起子里面(Tecniplast，意大利)。在4天的适应期后进行时24全程的粪便收集。

鲜血红素和粪便生命体量度：用Vaudois里面心医院临床科学实验室(LCC)量度胃和鲜血红素Na+、K+、Ca2+、Mg2+、磷碱盐、肌酐、、胃碱和胃素溶解度及渗透压。用碱碱璇(Metrohm)量度粪便pH取值。用作EPOC鲜血液UV(日立保健)量度动-动脉混搭鲜血的鲜血液pH取值和鲜血气。胃铵量度改用Berthelot法。胃可滴定碱量度改用Chan25作法。改用放射免疫法(DPC)量度鲜血红素醛固酮水平。用Mercodia公司的试剂盒量度鲜血红素皮质醇。

耐量试验(GTT)：禁食15全程后，给空白样本和cKOt昆虫模标准型十二指肠施用(1g/kg运动量)。分别于施用前(t=0)、施用后15、30、60、90、120、180min，用鲜低血糖读数璇量度鲜低血糖。

皮质醇耐量试验(ITT)：禁食4h后，给样本和cKOt昆虫模标准型十二指肠施用0.5U/kg运动量的重组人皮质醇(人重组皮质醇，Sigma)。分别于皮质醇施用前(t=0)、皮质醇施用后15、30、45、60、90、120、150、180min量度鲜低血糖。如果鲜低血糖回升2 mm不限，则通过十二指肠施用30毫克拯救昆虫模标准型，并将其排除在系统性之外。

RNA测序新技术：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus里面的描述进行时。用作GRCm38.92基因组注释。用作TMM归一化对基因组可用进行时定标，并用作LIMMA R包内27里面的“CPM”formula_将其平方根转换为每百万可用(CPM)。计算出来了KO和Ctrl昆虫在在在(PBS)和处理(STZ)情况下下的歧异理解以及共同点的作用力。对于这三种尤其里面的每一种，同样FDR

结果：在患有哮喘的cKOp和cKOt昆虫模标准型里面，做梦功用障碍与哮喘白血病的起因没有相关性。然而，与氨基酸脲佐青霉素治疗的样本比起，患有哮喘的cKOt昆虫模标准型平庸出加低鲜低血糖渐增，胃里面排泄缩减，多胃缩减，肝脏肥大更为显着。mRNA和酵素理解系统性显示，与哮喘样本昆虫模标准型比起，cKOt哮喘昆虫模标准型肝脏里面的新陈葡萄糖必需显著增强。CKOt哮喘昆虫模标准型的转录系统性和功用系统性明确了从外部或间接影响新陈葡萄糖必需的多种选择性的变化。

结论：我们证明了内在肾粘液做梦功用障碍可通过增强肾近端粘液的新陈葡萄糖而渐增哮喘低鲜低血糖，进一步重申了做梦缓冲在哮喘病患里面的重要性。

原文出处：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24